टीएबी की उपस्थिति में डायज़ोटाइज्ड सल्फ़ानिलिक एसिड के साथ कुल बिलीरुबिन युगल प्रत्यक्ष और अप्रत्यक्ष बिलीरुबिन दोनों के गुलाबी रंग के एज़ोबिलीरुबिन कॉम्प्लेक्स बनाते हैं और टीएबी की अनुपस्थिति में केवल प्रत्यक्ष बिलीरुबिन डायज़ोटाइज़्ड सल्फ़ानिलिक एसिड के साथ प्रतिक्रिया करके एज़ोबिलीरुबिन कॉम्प्लेक्स बनाते हैं। . बनने वाले रंग की तीव्रता सीधे नमूने में मौजूद बिलीरुबिन के समानुपाती होती है।
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